???????? 液相色譜HPLC 在分析研究和質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室中占有重要地位。與制造過(guò)程和研究結(jié)果發(fā)表有關(guān)的重要決定是基于 HPLC 系統(tǒng)生成的數(shù)據(jù)具有高度可靠性的情況下才能做出的決定。因?yàn)镠PLC 是一個(gè)多組分系統(tǒng)，因此分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性取決于每個(gè)組分的性能水平。恒譜生本文介紹了一些有助于提高結(jié)果真實(shí)性的建議。
??????? 流動(dòng)相
?????? 流動(dòng)相的主要作用是將注入的樣品運(yùn)送到色譜柱，在色譜柱中分離后將各個(gè)組分轉(zhuǎn)移到檢測(cè)器進(jìn)行識(shí)別和定量。流動(dòng)相應(yīng)在分析和HPLC開(kāi)始前新鮮制備，并且溶劑不能含任何懸浮顆粒。使用溶劑進(jìn)樣口過(guò)濾器對(duì)溶劑進(jìn)行過(guò)濾，避免雜質(zhì)進(jìn)入系統(tǒng)。恒譜生建議進(jìn)一步使用恒譜生在線過(guò)濾器或保護(hù)柱安裝在色譜柱前后能有效預(yù)防系統(tǒng)內(nèi)產(chǎn)生的顆粒物污染柱子。
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?????? 流動(dòng)相溶劑應(yīng)該彼此完全混溶，并且注入的樣品也應(yīng)該混溶。使用緩沖液作為流動(dòng)相組件時(shí)，切勿讓緩沖液在系統(tǒng)內(nèi)部變干，因?yàn)楦稍飼r(shí)形成的鹽會(huì)沉積并阻礙流動(dòng)相的自由流動(dòng)以及泵組件的損壞。
??????? 樣品
???????? 大體積進(jìn)樣會(huì)導(dǎo)致峰形失真，也會(huì)使色譜柱過(guò)載。分析實(shí)驗(yàn)前需要檢查樣品與流動(dòng)相的兼容性。如果溶解度較低，請(qǐng)嘗試使用與流動(dòng)相混合物極性相匹配的溶劑或溶劑組合。
?????? 柱子
??????? 色譜柱是 HPLC 系統(tǒng)的關(guān)鍵部件。它的正確保養(yǎng)和使用將大大有助于提供高可靠性的結(jié)果。操作流速和壓力應(yīng)該逐漸改變，這樣這些變化就不會(huì)干擾固定相填料。使用恒譜生保護(hù)柱還可以防止雜質(zhì)進(jìn)入主柱。由于流動(dòng)相的流量取決于溫度，因此強(qiáng)烈建議使用柱溫箱以保持恒定的柱溫以保持流速的一致性。
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???????? 泵
??????? 在梯度分析的情況下，需要一個(gè)泵來(lái)根據(jù)軟件程序保持流動(dòng)相的組成。通過(guò)防止損壞泵部件并在發(fā)現(xiàn)任何可見(jiàn)損壞時(shí)及時(shí)更換此類(lèi)部件來(lái)實(shí)現(xiàn)此類(lèi)條件。視情況允許沖洗中等極性溶劑或純水，逐漸沖洗泵。
??????? 光源
??????? 大多數(shù) HPLC 分析可以使用 UV 光源進(jìn)行。這種光源具有使用壽命。根據(jù)供應(yīng)商的建議更換燈將有助于提高吸光度值的重現(xiàn)性。
??????? 探測(cè)器
??????? 檢測(cè)器是 HPLC 系統(tǒng)的最終組成部分，可確認(rèn)不同樣品成分的存在并有助于對(duì)其進(jìn)行量化。恒譜生建議定期離線清潔檢測(cè)器，并在重新使用之前用水和流動(dòng)相沖洗。切勿超過(guò)工作壓力范圍，以防止可能損壞檢測(cè)器單元壁。
??????? 恒譜生提供的建議會(huì)有助于提高結(jié)果的質(zhì)量和準(zhǔn)確性，儀器的定期清洗和校準(zhǔn)，檢查儀器是否正常使用也是非常重要的。儀器昂貴，需要細(xì)心使用，一些日常的檢查和清洗過(guò)程能夠有助于延長(zhǎng)儀器使用壽命。
發(fā)布于: 2022-01-07