??????? 高效液相色譜(HPLC) 是一種流行且用途廣泛的技術(shù)，可為復(fù)雜有機(jī)樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經(jīng)濟(jì)實惠的解決方案。了解各個組成部分以及每個組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。
??????? 一、高效液相色譜及其部件介紹
系統(tǒng)主要組成部分為：
泵
探測器
根據(jù)應(yīng)用產(chǎn)生無限數(shù)量的其他配置。比如流動相、色譜柱、管線、保護(hù)柱等
??????? 二、什么是高效液相色譜？
??????? HPLC 是一種用于分離、鑒定和量化混合物中成分的技術(shù)。特別適用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和高分子量的化合物。
1、流動相
液相以恒定速率泵送到裝有固定相的柱中。在進(jìn)入色譜柱之前，分析樣品被注入載流中。
在到達(dá)色譜柱時，基于分析物分子和固定相之間的物理化學(xué)相互作用，樣品組分被選擇性地保留。
流動相用于將樣品輸送至系統(tǒng)。流動相的基本標(biāo)準(zhǔn)是對樣品組分的惰性。通常使用純?nèi)軇┗蚓彌_液組合。流動相應(yīng)不含顆粒雜質(zhì)并在使用前脫氣。流動相的顆粒雜質(zhì)去除是非常重要的，在流動相進(jìn)入系統(tǒng)前使用恒譜生多階溶劑吸濾頭進(jìn)行過濾，多種尺寸型號可選符合各種品牌的液相系統(tǒng)。并且不會將空氣引入系統(tǒng)內(nèi)部，溶劑利用率高達(dá)99.9%。
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2、流動相容器
這些是用于流動相儲存和運(yùn)輸?shù)亩栊匀萜?。一般采用透明玻璃瓶，便于目測容器內(nèi)流動相液位。內(nèi)部提供不銹鋼微粒過濾器，用于去除流動相中的微粒雜質(zhì)（如果有）。
3、泵
流動相流速的變化會影響樣品組分的洗脫時間并導(dǎo)致誤差。泵在恒定壓力下為色譜柱提供恒定流量的流動相。
4、進(jìn)樣器
進(jìn)樣器用于向流動相流中提供恒定體積的樣品注入。進(jìn)樣的惰性和可重復(fù)性對于保持高精度水平是必要的。
5、液相色譜柱
色譜柱是一個重要組成部分，應(yīng)按照供應(yīng)商的說明進(jìn)行適當(dāng)維護(hù)，以便在運(yùn)行后獲得重現(xiàn)性和分離效率。通常C18柱用途最為廣泛，可分析多種化合物。恒譜生色譜柱在硅膠基質(zhì)表面、孔徑和化學(xué)鍵合基團(tuán)又進(jìn)行了優(yōu)化，專門為快速分析進(jìn)行了一些優(yōu)化設(shè)計，例如孔徑增大，比表面積變小，因此分離更快速、高效，使其非常適合UHPLC、LC/MS/MS儀器分析。
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6、柱溫箱
分析運(yùn)行期間溫度的變化會導(dǎo)致分離的洗脫組分的保留時間發(fā)生變化。柱溫箱使用空氣循環(huán)保持恒定的柱溫。這確保了流動相通過色譜柱的恒定流速。
7、探測器
檢測器對液相色譜柱分離的組分提供特定響應(yīng)，并提供所需的靈敏度。它必須獨(dú)立于流動相組成的任何變化。盡管基于其他檢測技術(shù)的檢測器如今也很流行，但大多數(shù)應(yīng)用都需要 UV-VIS 檢測。
發(fā)布于: 2022-04-29